[单选题]ELISA试验以HRP为标记酶时,常用的供氢底物为()
正确答案 :A
OPD
解析:许多化合物可作为HRP的供氧体,在ELISA中常用的供氢体底物为邻苯二胺(OPD)、四甲基联苯胺(FMB)和ABTS。OPD为在ELISA中应用最多的底物,灵敏度高,比色方便。考点:酶和酶作用的底物
[单选题]下列不属于ELISA测定方法中所必需的试剂()
正确答案 :D
戊二醛交联剂
解析:ELISA是在固相载体上包被抗原或抗体后,通过抗原抗体反应使酶标抗体(或酶标抗原)结合到载体上,经洗涤使结合的酶标抗体和游离的酶标抗体分离,洗去游离的酶标抗体(或酶标抗原)。在这种测定方法中有3种必要的试剂:①固相的抗原或抗体。②酶标记的抗原或抗体。③酶作用的底物。间接法和捕获法还使用稀释的血清标本做试剂。戊二醛是一种双功能团试剂,可以使酶与蛋白质或其他抗原的氨基通过它而耦联。与ELISA的方法相反。考点:酶联免疫吸附试验方法类型及反应原理;酶标记抗体或抗原
[单选题]ELISA板包被后,最常用的封闭物质是()
正确答案 :C
牛血清白蛋白
解析:将抗原或抗体固相化的过程称为包被。由于载体的不同,包被的方法也不同。如以聚苯乙烯ELISA板为载体,通常将抗原或抗体溶于缓冲液(最常用的为pH9.6的碳酸缓冲液)中,加于ELISA板孔中在4℃过夜,经清洗后即可应用。如果包被液中的蛋白质浓度过低,固相载体表面有能被此蛋白质完全覆盖,其后加入的血清标本和酶结合物中的蛋白质也会部分地吸附于固相载体表面,最后产生非特异性显色而导致本底偏高。在这种情况下,如在包被后再用1%~5%牛血清白蛋白包被一次,可以消除这种干扰。这一过程称为封闭。包被好的ELISA板在低温可放置一段时间而不失去其免疫活性。考点:免疫吸附剂
[单选题]均相酶免疫测定不具有的特点是()
正确答案 :C
不易受样品中的内源性酶的干扰
解析:均相酶免疫测定是将半抗原或小分子抗原如药物、激素、毒品、兴奋剂等与晦结合制成酶标记物,酶与抗原(半抗原)结合后仍保留酶和抗原(半抗原)的活性。均相酶免疫测定操作简便、快速、适合于自动化,应用广泛,不仅可检测药物、激素、毒品、兴奋剂等半抗原或小分子抗原,也可测定大分子蛋白质、病毒及细胞性抗原成分。最大缺点是易受样品中非特异的内源性酶、酶抑制药及交叉反应物的干扰,而且由于采用竞争性结合分析原理,灵敏度不及异相酶免测定。考点:均相酶免疫测定
[单选题]ELISA中最常用的酶是()
正确答案 :E
辣根过氧化物酶和碱性磷酸酶
[单选题]关于ELISA的固相载体论述有误的是()
正确答案 :C
聚氯乙烯对蛋白质的吸附性能比聚苯乙烯低
[单选题]在ELISA中,不是ELISA的反应过程,但却是决定试验成败的关键的是()
正确答案 :B
洗涤
[单选题]酶联免疫吸附试验(ELISA)中应用最多的底物是()
正确答案 :B
四甲基联苯胺(TMB.
解析:邻苯二胺灵敏度高,比色方便,是ELISA中应用最早的底物,但稳定性差,反应过程需要避光,还具有致癌性;四甲基联苯胺稳定性好,反应无需避光,没有致突变作用,是目前应用最广泛的底物,但是水溶性差。
[单选题]ELISA技术中,最常用来检测抗原的方法是()
正确答案 :A
双抗体夹心法
[单选题]在体内没有内源酶的是()
正确答案 :C
脲酶
解析:碱性磷酸酶提取于小牛肠黏膜或大肠杆菌
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